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DL_T 1116-2021 循环冷却水用杀菌剂性能评价.pdfICS27.100 CCS F 29
Performanceevaluationofmicrobicidesforcirculatingcoolingwater
前言： 范围· 规范性引用文件 术语和定义 方法概要 试剂及材料 仪器设备 杀菌剂储备液及试验溶液配制 杀菌剂溶解性评价试验· 9静态杀菌评价试验 10动态杀菌评价试验 11杀菌剂对阻垢缓蚀剂的效果影响评价试验 附录A（规范性）异养菌的富集培养
大体积混凝土夏期施工方案前言： 范围· 规范性引用文件 术语和定义 方法概要 试剂及材料 仪器设备 杀菌剂储备液及试验溶液配制 杀菌剂溶解性评价试验· 9静态杀菌评价试验 10动态杀菌评价试验 11杀菌剂对阻垢缓蚀剂的效果影响评价试验 附录A（规范性）异养菌的富集培养
DL/T1116—2021
循环冷却水用杀菌剂性能评价
本文件规定了循环冷却水用杀菌剂的溶解性能、杀菌效果及其对阻垢缓蚀剂使用效果影响的评价 方法。 本文件适用于火力发电厂、核电厂循环冷却水用杀菌剂的性能评价
本文件没有需要界定的术语和定义。
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从现场采集循环冷却水、补充水或生物黏泥沉积物等样品，制备成试验水样，通过静态杀菌试验 或动态杀菌试验，评价杀菌剂的性能。 静态杀菌试验是以恒温摇床为细菌培养环境，向试验水样加入一定剂量的杀菌剂，在规定时间段 内测定试验水样中异养菌总数，并与空白试验结果进行比较，从而评价该杀菌剂的杀菌效果。该试验 结果可作为杀菌剂的筛选依据。 动态杀菌试验是以循环水动态模拟试验系统为细菌培养环境，模拟循环冷却水流速和温度、补水 率、排污率、蒸发与吹散损失率、阻垢缓蚀剂添加种类和剂量以及杀菌剂停留时间等状况；向循环冷 却水中加入一定剂量的杀菌剂，并在规定时间段内测定循环冷却水中异养菌总数，从而评价杀菌剂在 使用浓度下的杀菌效果及抑菌时效。该试验结果可作为确定现场循环冷却水系统杀菌剂加药剂量、加 药方式的参考依据。
5.1 所用试剂，除非另有规定，应使用分析纯试剂和符合GB/T6682三级水的规定。试验中所需制齐 及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T603的规定制备。 5.2磷酸二氢钾。
5.3氢氧化钠溶液：40% 5.4氯化钠。 5.5牛肉膏：生化试剂。 5.6蛋白陈：生化试剂。 5.7琼脂：生物试剂。 5.8盐酸溶液：1+11。 5.9牛皮纸。 5.10医用脱脂棉。 5.11医用脱脂纱布。 5.12磷酸盐储备液：溶解34.00g磷酸二氢钾于500mL除盐水中，使用40%的氢氧化钠溶液（5.3） 调节pH值为7.2土0.2，稀释至1000mL，灭菌后备用。 5.13磷酸盐稀释液：加1.25mL磷酸盐储备液（5.12）和8.72g氯化钠于1000mL除盐水中，调节 pH值为7.2土0.2，灭菌后用试管分装9.0mL备用。 5.14稀释水：使用灭菌后的磷酸盐稀释液（5.13），缓冲强度或盐度可根据试验或现场情况进行调节。
5.11 M 医用脱脂纱布。 5.12磷酸盐储备液：溶解34.00g磷酸二氢钾于500mL除盐水中，使用40%的氢氧化钠溶液（5.3） 调节pH值为7.2土0.2，稀释至1000mL，灭菌后备用。 5.13磷酸盐稀释液：加1.25mL磷酸盐储备液（5.12）和8.72g氯化钠于1000mL除盐水中，调节 pH值为7.2土0.2，灭菌后用试管分装9.0mL备用。 5.14稀释水：使用灭菌后的磷酸盐稀释液（5.13），缓冲强度或盐度可根据试验或现场情况进行调节
6.1电子大平：感量0.1mg。 6.2pH计：精度0.02。 6.3医用蒸汽灭菌锅：额定温度126℃～128℃。 6.4容量瓶：1000mL。 6.5刻度吸管：1mL、5mL、10mL。 6.6量筒：25mL、50mL。 6.7磨口三角瓶：100mL。 6.8试管：10mL。 6.9培养Ⅲ：Φ90mm。 6.10三角瓶：500mL。 6.11生物显微镜：放大倍数40倍～10000倍。 6.12恒温摇床：控温精度土0.5°℃。 6.13无菌箱（室）或超净工作台。 6.14生化培养箱：温度波动土1℃。
电子天平：感量0.1mg。 6.2 1 pH计：精度0.02。 6.3 医用蒸汽灭菌锅：额定温度126°℃～128°℃ 6.4容量瓶：1000mL。 6.5刻度吸管：1mL、5mL、10mL。 6.6量筒：25mL、50mL。 6.7 磨口三角瓶：100mL。 6.8试管：10mL。 6.9培养Ⅲ：Φ90mm。 6.10 ）三角瓶：500mL。 6.11 生物显微镜：放大倍数40倍～10000倍。 6.12 2恒温摇床：控温精度土0.5C。 6.13 3无菌箱（室）或超净工作台。 6.14 生化培养箱：温度波动土1C
菌剂储备液及试验溶液配制
7.1对特定杀菌剂应确定适宜的浓度。杀菌剂活性组分含量宜在1mg/L～50mg/L范围内，可选择 1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、25.0mg/L、50.0mg/L等活性浓度，或参照杀菌剂产品使用 说明书推荐的使用浓度。杀菌剂储备液加入量对试验水样体积的影响应小于1%。 7.2配制5.0mg/mL杀菌剂储备液。称取5.00g杀菌剂用稀释水（5.14）溶解并稀释至1L，每100mL 样品中分别加入0.2mL、0.5mL、1.0mL此储备液，配制成杀菌剂浓度为10.0mg/L、25.0mg/L、 50.0mg/L的试验溶液。 7.3配制0.5mg/mL杀菌剂储备液。称取0.5g杀菌剂用稀释水（5.14）溶解并稀释至1L，每100mL 样品中分别加入0.2mL、0.4mL、1.0mL此储备液，配制成杀菌剂浓度为1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L 的溶液。 7.4如果加入特定浓度的杀菌剂没有达到预期的菌落总数降低值，应调节储备液浓度以符合试验的要 求。杀菌剂储备液配制好后，应在3h内使用。
7.1对特定杀菌剂应确定适宜的浓度。杀菌剂活性组分含量宜在1mg/L～50mg/L范围内，可选择 1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、25.0mg/L、50.0mg/L等活性浓度，或参照杀菌剂产品使用 说明书推荐的使用浓度。杀菌剂储备液加入量对试验水样体积的影响应小于1%。 7.2配制5.0mg/mL杀菌剂储备液。称取5.00g杀菌剂用稀释水（5.14）溶解并稀释至1L，每100ml 样品中分别加入0.2mL、0.5mL、1.0mL此储备液，配制成杀菌剂浓度为10.0mg/L、25.0mg/L、 50.0mg/L的试验溶液。 7.3配制0.5mg/mL杀菌剂储备液。称取0.5g杀菌剂用稀释水（5.14）溶解并稀释至1L，每100ml 样品中分别加入0.2mL、0.4mL、1.0mL此储备液，配制成杀菌剂浓度为1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/l 的溶液。 7.4如果加入特定浓度的杀菌剂没有达到预期的菌落总数降低值，应调节储备液浓度以符合试验的要 求。杀菌剂储备液配制好后，应在3h内使用。
8杀菌剂溶解性评价试验
按GB/T6324.1的规定进行， H 静态杀菌评价试验
9.1.1使用灭菌后的2L容器采集循环冷却水样品，取样时记录水样的温度和pH值。 9.1.2循环冷却水取样前24h应停止添加杀菌剂。 9.1.3循环冷却水取样后常温保存，宜在24h内进行测试，如果取样和测试时样品pH值变化超过 1.0，该样品应废弃。 9.1.4使用灭菌后的容器盛装循环冷却水系统生物黏泥沉积物，采集样品后常温保存。样品到达实验 室后，可先用生物显微镜对其进行观察，确定其自然状态下的生物形态。
9.2.1选择以下方法之一制备杀菌试验水样： a）直接采用现场的循环冷却水作为试验水样。 b）以膜过滤除菌后的循环冷却水作为培养载体，采用已知微生物进行接种制备试验水样。 c）采用循环冷却水系统的生物黏泥沉积物和稀释水（5.14）制备试验水样；生物黏泥沉积物加入 量不应超过样品总量的10%。 9.2.2用于杀菌试验的水样中异养菌总数应大于1.0X10^CFU/mL，否则应按附录A的规定进行富集 培养。 9.2.3将试验水样注入搅拌器中连续搅拌，移取100mL土2mL于已灭菌的稀释瓶中。
9.3不同杀菌剂性能试验
向试验水样中添加同一种类、不同剂量的杀菌剂，加药剂量可根据7.1选取。将加药后的试验水样 及空白水样同时放入恒温摇床中，控制摇床温度为40.0℃，转速为100r/min～120r/min，其余操作步 骤同9.3.2和9.3.3。 注：在整个试验期内，空白试验水样的异养菌总数应相对稳定或略有增加；若空白试验水样的异养菌总数降低大 于50%，应终止试验。该点试验结果不能用于杀菌剂性能评价。
9.5.1静态杀菌试验时，异养菌杀灭率以Y计，按公式（1）计算，
9.5.1静态杀菌试验时，异养菌杀灭率以Y计，按公式（1）计算，即
A"—空白试验水样在t时刻检出的异养菌总数，单位为菌落数每毫升（CFU/mL)； A.一一加杀菌剂试验水样在t时刻检出的异养菌总数，单位为菌落数每毫升（CFU/mL） 9.5.2根据试验结果确定各种杀菌剂的相对性能优劣及最低有效浓度。
10.1以现场循环冷却水系统的补充水作为试验水样，补充水水样可采用干净塑料桶盛装，并在取样前 用现场补充水清洗塑料桶。 10.2参照DL/T300方法，模拟现场循环水流速、温度、pH值、浓缩倍率、阻垢缓蚀剂添加种类、剂 量以及杀菌剂停留时间等状况，开展循环水动态模拟试验，并在模拟系统中进行动态杀菌评价试验。 10.3动态杀菌试验可采用冲击性加药或连续性加药方式；加药量可根据9.4的试验结果进行选择或根 据现场实际情况确定。 10.4按照GB/T14643.1，分别在加药前及冲击性加药后3h、12h、24h、48h、72h、96h，测定循 环冷却水的异养菌总数，计算出不同时间内对异养菌的杀灭率。取样测定时间也可根据静态杀菌试验 情况确定。 10.5连续性投加杀菌时，定期测定循环冷却水异养菌总数，取样测试频率宜每天1次～2次，每一种 杀菌工况连续监测不少于3d。 10.6杀菌后循环冷却水的异养菌总数不宜大于1.0×10CFU/mL。 10.7动态杀菌试验时，对异养菌杀灭率以Y计，按公式（2）计算，即：
X。一加杀菌剂前循环冷却水初始的异养菌总数，单位为菌落数每毫升（CFU/mL）； X，一加杀菌剂后t时刻循环冷却水中的异养菌总数，单位为菌落数每毫升（CFU/mL）。 10.8根据试验结果评价动态杀菌性能。试验结果可作为循环冷却水系统杀菌剂加药方式、加药剂量的 参考依据。
11.2对金属材料缓蚀效率的影响
11.3.1杀菌剂对阻垢缓蚀剂阻垢效果的影响程度以P计，按公式（3）计算：
一未加杀菌剂时试验溶液的极限碳酸盐硬度，单位为毫摩尔每升（mmol/L）；
· *... . Z
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式中： n—添加杀菌剂后阻垢缓蚀剂对金属材料的缓蚀效率，数值以%表
7。一未加杀菌剂时阻垢缓蚀剂对金属材料的缓蚀效率JGJ355-2015《钢筋套筒灌浆连接应用技术规程》.pdf，数值以%表示；
7。一未加杀菌剂时阻垢缓蚀剂对金属材料的缓蚀效率，数值以%表示： 7一添加杀菌剂后阻垢缓蚀剂对金属材料的缓蚀效率，数值以%表示。 11.3.3按以下规定评价杀菌剂对阻垢缓蚀剂使用效果的影响程度： P≥0、P≥0时，Pz、P值越大，相容性越好； P<0B<0时」P」IPL值越本相空性越差
11.3.3按以下规定评价杀菌剂对阻垢缓蚀剂使用效果的影响程度：
P≥0、P≥0时，P、P值越大，相容性越好； P<0、P<0时，P、IP|值越大，相容性越差。
DL/T11162021
附录A （规范性） 异养菌的富集培养
A.1液体培养基的制备。称取试剂。牛肉膏3.0g、蛋白陈10.0g、氯化钠5.0g，依次加入盛有约 950mL试剂水的烧杯中，在电炉上加热溶解后，趁热用四层医用脱脂纱布过滤，并用热水补充至 1000mL。用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节pH值至7.0土0.2，并分装在500mL三角瓶中，每瓶分装量 不超过其总容量的2/3。塞上棉塞，用牛皮纸把瓶口包好，用医用蒸汽灭菌锅灭菌15min～30min。 A.2取异养菌含量低于1.0×10CFU/mL的循环冷却水样10.0mL，加入到100mL的液体培养基中， 摇匀后置29℃土1℃下恒温培养24h以上。 A.3吸取上述培养液（A.2）适量，加入异养菌含量低于1.0X10^CFU/mL的循环冷却水样（一般培养 液和循环水的比例不超过1：100）。 A.4为了使试样中菌数控制在1.0X10CFU/mL～1.0×10?CFU/mL范围，应先做一系列的平血计数， 以找出相应的大致关系。
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