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CJ_T141-2018 城镇供水水质标准检验方法.pdf

.2.9.1精密度：4个实验室分别向10L纯水，20L水源水和出厂水样品中加入100个贾第鞭毛 00个隐孢子虫，其相对标准偏差见表91

表91隐抱子虫和费第鞭毛虫测定结果的精密

.2.9.2准确度：4个实验室分别向10L纯水，20L水源水和出厂水样品中加人100个贾第鞭毛 00个隐孢子虫，其回收率见表92

专92隐孢子虫和贾第鞭毛虫测定结果的准确度

DB44／T 1639.1-2015 半导体照明标准光组件总则 第1部分：层级划分.pdf10.2.1滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法 按10.1.1的要求。 10.2.2滤囊浓缩/密度梯度分离荧光抗体法 按10.1.2的要求

10.2.1滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法 按10.1.1的要求。 10.2.2滤囊浓缩/密度梯度分离荧光抗体法 按10.1.2的要求

[10.3. 1.1 适用范围

本方法规定了用发酵法测定城镇供水及其水源水中的粪性链球菌。 本方法适用于城镇供水及其水源水中粪性链球菌的测定

在此种培养液中生长的菌体可认为是粪性链球菌推测试验阳性。取推测试验为阳性的培养液移至 frizer培养基上做确信试验，能在Pfrizer培养基上有棕色晕轮的棕黑色菌落生成，则表示粪性链球菌 的证实试验为阳性。

10.3.1.3试剂和材料

0.3.1.3.1叠氮化物葡萄糖液态培养基：分别称取4.5g牛肉膏、15g胰陈或聚陈、0.2g叠氮化钠、 .5g葡萄糖和7.5g氯化钠于烧杯中，加人约900mL蒸馏水，加热溶解，用蒸馏水稀释至1000mL，调 节pH值使其灭菌后为7.2士0.1，分装于试管内，用高压灭菌器在121℃灭菌15min。 上述各组分取2倍量为双倍强度培养基。 0.3.1.3.2Pfrizer选择性肠球菌琼脂培养基：分别称取20.0g蛋白陈、5.0g酵母膏、10.0g3号胆盐、 .0g氯化钠、1.0g柠檬酸钠、1.0g七叶苷、0.5g柠檬酸铁铵、25.0g叠氮化钠和15.0g琼脂，加人约 00mL蒸馏水，加热溶解，用蒸馏水稀释至1000mL，调节pH值使其灭菌后为7.2土0.1，分装于试管 内，121℃灭菌15min

10.3.1.4.1高压蒸气灭菌器。

10.3.1.5.1推测试验 10.3.1.5.1.1接种不同量的被检水样于一组叠氮化物葡萄糖液态培养基（10.3.1.3.1)中；接种1mL或 更少的水样于单倍强度的液态培养基10mL中，接种10mL的水样于双倍浓度的液态培养基10mL 中，接种量的多少与数目应依水样的特性而有所变化，接种量宜为1mL的十进倍数， 10.3.1.5.1.2接种过的试管应在35℃土0.5℃的恒温培养箱内培养24h土2h后检查每一支试管是否 有浑浊，如果浑浊不明显，应继续培养到48h士3h后进行检查。 10.3.1.5.2确信试验 10.3.1.5.2.1经过24h或48h培养而显示浑浊的所有的叠氮化物葡萄糖液态培养基试管应进一步做 确信试验。 10.3.1.5.2.2从推测试验为阳性的试管内取一些培养液，划线转移到培养皿中，其内盛有pfrizer选择 生肠球菌琼脂培养基（10.3.1.3.2)，培养血在35土0.5℃倒置培养24h土2h，具有棕色晕轮的棕黑色 菌落生成则显示粪性链球菌存在

10.3.1.6最大可能数（MPN值）的计算及记

根据确信试验的阳性管数查最可能数（MPN)表（见表93），即可得100mL水样中的粪链球菌的） 数。 对表中未被列入的组合，以及当试管数和稀释情况不同时，可用式（54)计算： 阳性试管数×100 MPN/100mL: ·（54 /阳性试管中的水样毫升数×全部试管中的水样毫升数

表93最可能数（MPN）表

10.3.2.1 适用范围

见定了用滤膜法测定城镇供水及其水源水中的粪 适用于城镇供水及其水源水中粪性链球菌的测定

10.3.2.3试剂和材料

10.3.2.3.1KF链球菌琼脂培养基：分别称取10.0g3号胰陈或聚陈、20.0g麦芽糖、1.0g乳糖、10.0g 酵母浸膏、5.0g氯化钠、0.4g叠氮化钠、10.0g甘油磷酸钠和20.0g琼脂于烧杯中，加人1000mL蒸馏 水，置于沸水浴内加热，以溶解其中的琼脂，待完全溶解后再加热5min，然后冷却，温度降到50℃或 60℃时，于100mL培养基内再加1mL的1%无菌的氯化三苯基四氮唑溶液（用0.22μm滤膜过滤除 菌，用10%的Na2CO：溶液将pH值调到7.2）。培养基于45℃～50℃保存，到灌人平皿之前不可超过 4h，有培养基的平血应在2℃~10℃保存。保存期为30d。

CI/T 141—2018

10.3.2.4.1抽滤设备。 10.3.2.4.2 显微镜：10倍15倍。 10.3.2.4.3 滤器。 10.3.2.4.4 无齿镊子。 10.3.2.4.5 滤膜：孔径0.45um和0.22μm，直径根据滤器规格而定，常用的有3.5cm和4.7cm两种。 10.3.2.4.6其他仪器同多管发酵法

10.3.2.5测定步骤

0.3.2.5.1推测试验

10.3.2.5.1.1水样过滤：根据水质情况决定过滤水样量，水样量以滤过一张无菌滤膜后能产生20到 100个菌落为宜。滤膜经过滤后应直接转移到培养基上，滤膜和培养基之间不应夹留空气泡。 10.3.2.5.1.2培养：将培养皿倒置，在35℃±0.5℃培养48h。 10.3.2.5.1.3计数：粪性链球菌菌落在滤膜上呈现大小不等的红色或粉红色菌落，可用一台低倍（10~ 15倍）的双筒、广野的解剖显微镜或其他功效相同的光学器械，计数每100mL水样中的粪性链球菌 落数

10.3.2.5.2确信试验

10.3.2.6结果计数

水样中经证实的粪性链球菌菌落数的计算见式（63）： CEU/100.mL=e

式中： CFU 水样的粪性链球菌菌落数：

N 水样中数出经证实的粪性链球菌菌落数 V 过滤的水样体积，单位为毫升（mL）

4.1液体培养基增菌法

10.4.1.1适用范围

10.4.1.3试剂和材料

10.4.1.4.1恒温培养箱：温度37℃±1℃

10.4.1.4.2细菌过滤器。 10.4.1.4.3恒温水浴锅。 10.4.1.4.4螺口带盖玻璃瓶：100mL和25mL。 10.4.1.4.5 移液管：100mL、50mL、10mL和1mL。 10.4.1.4.6试管：150mmX13mm。 10.4.1.4.7接种环

10.4.1.4.2细菌过滤器。 10.4.1,4.3恒温水浴锅。 10.4.1.4.4螺口带盖玻璃瓶：100mL和25mL。 10.4.1.4.5移液管：100mL、50mL、10mL和1mL。 10.4.1.4.6试管：150mmX13mm。 10.4.1.4.7接种环。

10.4.1.4.2细菌过滤器。 10.4.1.4.3恒温水浴锅。 0.4.1.4.4螺口带盖玻璃瓶：100mL和25mL。 0.4.1.4.5移液管：100mL、50mL、10mL和1mL。 0.4.1.4.6试管：150mmX13mm。 10.4.1.4.7接种环

10.4.1.5 分析步骤

0.4.1.6计数及报告结果

10.4.2.1适用范围

10.4.2.3试剂和材料

10.4.2.4.1培养箱：温度37℃±1℃。 10.4.2.4.2 抽滤设备。 10.4.2.4.3 水浴锅。 10.4.2.4.4 滤膜过滤器。 10.4.2.4.5 无齿镊子。 10.4.2.4.6 三角瓶：2L。 10.4.2.4.7 试管：160mmX16mm。 10.4.2.4.8 移液管：10mL。 10.4.2.4.9 烧杯：1L。 10.4.2.4.10 培养血。 10.4.2.4.11 滤膜：孔径0.2μm。 10.4.2.5 分析步骤 10.4.2.5.1 滤膜灭菌：将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸灭菌3次，每次15min。前 两次煮沸后应更换水洗涤2次～3次，以除去残留溶剂。 10.4.2.5.2滤器灭菌：视滤器质地采用干热（酒精棉球火焰）或湿热灭菌。 10.4.2.5.3孢子的选择：水样在试验前应放置于水浴锅中，75℃土5℃加热15min。用同样的水样瓶

10.4.2.4.1培养箱：温度37℃土1℃。 10.4.2.4.2 抽滤设备。 10.4.2.4.3 水浴锅。 10.4.2.4.4 滤膜过滤器。 10.4.2.4.5 无齿镊子。 10.4.2.4.6 三角瓶：2L。 10.4.2.4.7 试管：160mmX16mm。 10.4.2.4.8 移液管：10mL。 10.4.2.4.9 烧杯：1L。 10.4.2.4.10 培养血。 10.4.2.4.11 滤膜孔径0.2um。

10.4.2.5分析步骤

.2.5.1滤膜火菌：将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸火菌3次，每次15min。 煮沸后应更换水洗涤2次～3次，以除去残留溶剂。 ，2.5.2滤器灭菌：视滤器质地采用干热（酒精棉球火焰）或湿热灭菌。 .2.5.3孢子的选择：水样在试验前应放置于水浴锅中，75℃土5℃加热15min。用同样的水样

.2.5.1滤膜火菌：将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸火菌3次，每次15min。 煮沸后应更换水洗涤2次～3次，以除去残留溶剂。 ，2.5.2滤器灭菌：视滤器质地采用干热（酒精棉球火焰）或湿热灭菌。 .2.5.3孢子的选择：水样在试验前应放置于水浴锅中，75℃土5℃加热15min。用同样的水样

作空白，用温度计检查加热温度。

10.4.2.5.4接种与培养包括下列分析步骤： a） 水样的过滤量应适当：对于饮用水、泉水、井水、海水、地面水和梭状芽抱杆菌轻度污染的水，取 100mL过滤；对污染严重的水或废水，可用无菌水稀释后检测。 b 调配一定的稀释度，使在滤膜上生长的黑色菌落分离，而更易于计数。 C 水样过滤后，用无菌镊子将滤膜过滤面朝下，置于培养血中，同时使滤膜下无气泡。小心地将 18mL约50℃的完全培养基（10.4.2.3.4)或替代培养基（10.4.2.3.5)倾注于培养血中的膜上。 在形成培养基层后，于37℃土1℃厌氧培养20h士4h和44h士4h。如果使用厌氧瓶或厌氧 培养箱，滤膜可放置在琼脂面上，且滤膜面向上。 10.4.2.5.5观察结果：培养20h士4h和44h士4h后，计数所有黑色菌落

10.4.2.5.4接种与培养包括下列分析步骤

10.4.2.6分析结果的表述

11.1城镇供水的致突变物

[11.1.1 适用范围

采用鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验。本方法规定了用鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体 酶试验测定城镇供水的致突变物。 本方法适用于城镇供水及其源水水质致突变物的测定。 本方法规定以2L为接种的最高检测水样体积

人工诱变鼠伤寒沙门氏菌突变株（即组氨酸营养缺陷型），在无组氨酸的培养基上不能生长，如受到 改突变物的作用，使其基因发生变化而回复窦变为原来的野生型，即使在缺乏组氨酸的条件下也能生 长，见图45。致突变物包括直接致突变物和间接致突变物，间接致突变物需代谢活化后具有致突变性。 正向突变 回复突变 野生型 +组氨酸营养缺陷型 野生型

11.1.3试剂和材料

图45水中致突变物对鼠伤寒沙门氏菌的作用

11.1,4.1 高压蒸气灭菌器， 11.1.4.2 干热灭菌箱。 11.1.4.3 恒温箱。 11.1.4.4 普通冰箱。 11.1.4.5 高速冷冻离心机：12000r/min。 11.1.4.6 一80℃低温冰箱或液氮罐。 11.1.4.7 超净工作台。 11.1.4.8 恒温水浴锅。 11.1.4.9 真空泵。 11.1,.4. 10 自动菌落计数器。 11. 1.4.11 微量加液器或微量注射器：100μL～500μL。 11.1.4.12 试管、90平血、分度吸管：置于干热灭菌箱160℃，灭菌8h。 11. 1.4.13 振荡培养箱

11.1.4.1 高压蒸气灭菌器。 11.1.4.2 干热灭菌箱。 11.1.4.3 恒温箱。 11.1.4,4 普通冰箱。 11.1.4.5 高速冷冻离心机：12000r/min。 11.1.4.6 一80℃低温冰箱或液氮罐。 11. 1,4.7 超净工作台。 11.1.4.8 恒温水浴锅。 11.1.4.9 真空泵。 11.1,4. 10 自动菌落计数器。 11. 1,4.11 微量加液器或微量注射器：100 11.1.4.12 试管、$90平血、分度吸管：置于 11.1.4.13 振荡培养箱

11.1.5试验菌种的选用、鉴定与保存

11.1.5.1菌种的选用

鉴于TA98，TA100菌种特性变异小，不易丢失、且能分别测试移码型突变和喊基置换型突变，因此 本试验宜采用TΛ98，TA100作为测试菌种

[11.1.5.,2菌种鉴定

11.1.5.3菌种的保存

11.1.5.3.110mL增菌液中加入1mL二甲基亚砜（DMSO），在一60℃~一80℃可保存6个月~ 12个月。 11.1.5.3.2营养琼脂面增菌保存,在 4 ℃可保存 3个月。

11.1.6 分析步需

11.1.6.1水样浓缩液的制备

11.1.6.2试验方法和步骤

储灰场加四级、五级、六级子坝工程施工组织设计11.1.6.2试验方法和步

11.1.6.2.1试验方法：平板掺入法。

11.1.6.2.1试验方法：平板掺入法。 11.1.6.2.2平板掺入法包括下列步骤

d）对照：自发回变和阳性对照做三 平行测定。 自发回变每血加0.1mLDMSO，阳性对照 加0.1mL阳性对照物

2008湖北省装饰工程消耗定额及统一基价表.pdf11.1.7结果分析及评价

11. 1.8 质量控制

城镇供水水质标准检验方法 中国标准出版社