标准规范下载简介
T／CNCIA 03002-2020 涂料（漆膜）抗病毒性能测试方法.pdfT/CNCIA 03002—2020
Test method for determining the antiviral activity of coating
中国涂料工业协会 发布
某校园绿化施工组织设计范围 规范性引用文件 术语和定义 试验原理 试剂和材料 仪器设备 试验准备 试验步骤 抗病毒耐久性试验 10试验报告 附录A（资料性附录） EMEM培养基配方表 参老文献…
本文件依据GBT1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》 的规定起草。 本文件由中国涂料工业协会提出并归口。 本文件主要起草单位：广东省微生物研究所、三棵树涂料股份有限公司、托尔专用化学 品（镇江）有限公司、立邦涂料（中国）有限公司、富思特新材料科技发展股份有限公司、 四川布顿凡克新材料有限公司、陶氏化学（中国）投资有限公司、东莞大宝化工制品有限公 司、巴斯夫新材料有限公司、中国涂料工业协会。 本文件参与起草单位：中国建筑材料科学研究总院有限公司、中国科学院大连化学物理 研究所、广东嘉宝莉科技材料有限公司、产东美涂士建材股份有限公司、山西亮龙涂料有限 公司、庞贝捷涂料（上海）有限公司、湖南松井新材料股份有限公司、深圳市广田科学技术 发展研究院、辽宁方客来玉业发展有限公司、环涂士涂料有限公司、青岛兴国涂料有限公司、 维新制漆（江西）有限公司、福建升大涂料有限公司、东来涂料技术（上海）股份有限公司、 亚士漆（上海）有限公司、广东华润涂料有限公司、华夏贝能（北京）生态科技有限公司、 湛新树脂（中国）有限公司、南京曦浪新材料科技有限公司、青岛易多尔新材料科技有限公 同、国投盛世承德科技股份有限公司。 本文件主要起草人：谢小保、黎玉莲、林昌庆、章叶萍、顾剑勇、刘东华、钱胜华、南 璇、张珈铭、孙丽超、王继梅、马磊、区英强、张旭、张保君、陈强、伍松、李少强、王兆 哲、周夏辉、刘彩霞、王立峰、胡浪湄、罗映宾、裴道海、谢晓芳、朱胜美、戴顺安、熊荣、 郭文迅、赵化喆、刘严蓬、齐祥昭、李力。 本文件为首次发布。
T/CNCIA030022020
余料（漆膜）抗病毒性能测试方法
本文件规定了涂料（漆膜)抗病毒性能测试的术语和定义、试验原理、试剂和材料、仪器设备、试验准 备、试验步骤、抗病毒耐久性试验及试验报告。 本文件适用于涂料（漆膜）抗病毒性能的测定，包括水性涂料、溶剂型涂料、辐射固化涂料及粉末 涂料。
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 3186 色漆、清漆和色漆与清漆用原材料取样 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 9278 涂料试样状态调节和试验的温湿度 GB 19258 紫外线杀菌灯 GB 19489 实验室生物安全通用要求 YY0569 Ⅱ级生物安全柜
下列术语和定义适用于本文件， 3.1 病毒virus 没有细胞结构、只能在宿主细胞内进行复制的微生物或遗传单元，通常由蛋白质和一种类型的核 (DNA或RNA)组成。 3.2 抗病毒antiviral 通过物理或化学等措施，便样品表面感染病毒数量减少的状态。 3.3 抗病毒活性值antiviralactivity 经过抗病毒处理的样品与未经抗病毒处理的样品在接种病毒培养后病毒感染滴度的对数差值 3.4 抗病毒率antiviralrate 经过抗病毒处理的样品与未经抗病毒处理的样品在接种病毒培养后，病毒感染滴度相比较减少
T/CNCIA03002—2020
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白分率。 3.5 病毒的感染滴度infectivitytiterofvirus 单位体积的细胞溶解产物或溶液中具有感染性的病毒颗粒数目。 3.6 蚀斑plaque 由单个具有感染能力的病毒颗粒在半固体培养基下的单层细胞中形成的一个局限性区域。 3.7 蚀斑形成单位plaqueformingunits;PFU 表示单位体积中病毒浓度的单位。 3.8 蚀斑试验plaqueassay 通过梯度稀释法确定以PFU形式表示的病毒感染滴度的测试方法。 3.9 半数组织培养感染剂量50%tissuecultureinfectivedose，TCIDso 病毒洗脱液或病毒稀释液中引起50%细胞病变的可感染性病毒的浓度。 3.10 抗病毒耐久性 antivirusdurability 模拟产品使用过程的光照老化方式，经过一定时间的紫外光照射后的抗病毒性能
白分率。 3.5 病毒的感染滴度infectivitytiterofvirus 单位体积的细胞溶解产物或溶液中具有感染性的病毒颗粒数目。 3.6 蚀斑plaque 由单个具有感染能力的病毒颗粒在半固体培养基下的单层细胞中形成的一个局限性区域 3.7 蚀斑形成单位plaqueformingunits;PFU 表示单位体积中病毒浓度的单位。 3.8 蚀斑试验plaqueassay 通过梯度稀释法确定以PFU形式表示的病毒感染滴度的测试方法。 3.9 半数组织培养感染剂量50%tissuecultureinfectivedose，TCIDso 病毒洗脱液或病毒稀释液中引起50%细胞病变的可感染性病毒的浓度。 3.10 抗病毒耐久性 antivirusdurability 模拟产品使用过程的光照老化方式，经过一定时间的紫外光照射后的抗病毒性能
将病毒接种于制备好的样品上，经特定的接触时间后，通过比较试样和对照样中计数到的存活病毒 的值来计算病毒的减少率。有两种方法可以计算感染性病毒滴度：一是蚀斑试验（见8.5.1）；另一种是 TCIDs0方法（见8.5.2）。 注，病毒计算方法实验室可以根据自身的实验条件和实验技术选择
测试病毒见表1，也可以选择其他病毒进行试验，同时选择相应的病毒宿主细胞，并保证整个操作 过程满足实验室生物安全要求
不影响病毒毒力和稳定性，并且不吸水的材料（以聚乙烯、聚丙烯或聚酯如聚对苯二甲酸乙二醇酯 制成）。用70%乙醇溶液浸泡10min，再以无菌水冲洗，自然干燥后备用。 注：均质袋切下的膜也适用
下列配方制备试剂，也可按所操作的病毒及宿主的情况自行购买适用的等效商品化试剂。
应符合GB/T6682—2008规定的三级水
应符合GB/T6682一2008规定的三级水
5.3.3最低必需培养基(EMEM
配方见附录A。商用培养基若有任何成分缺失，可根据EMEM配方表添加，见附录A中表A
5.3.47.5%NaHCO.溶液
特75gNaHC3浴于8UUmL水中，定谷至 1000mL配成7.5%NaHCO3浴液。便用0.22 滤器对溶液进行过滤除菌。配制后如不立即使用，应置于2℃～8℃保存。保存期限不得走 个月。
将100mL37%的甲醛溶液加到900mL的水中制备甲醛溶液。配制后如不立即使用，应置于 20℃～25℃保存。保存期限不得超过1个月。 注：可使用其他经验证合格的细胞固定液
5.3.6亚甲基蓝溶液
取0.375g亚甲基蓝和62.5μL1mol/L 1000mL的水中制备亚甲基蓝溶液。 配制后如不立即使用，应置于20℃～25℃保存。保存期限不得超过1个月
5.3.7灭活的胎生血清（FBS）
把低温贮藏的胎牛血清于37℃水浴解冻溶解。然后，将水浴锅的水温升温至56℃后再维持 30min灭活，分装后置于一20℃冰箱里保存。使用前，于37℃水浴解冻
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5.3.10双倍浓度的维持培养基
5.3.11磷酸盐缓冲液（PBS)
将8.0gNaCl、0.2gKC1、2.9gNa2HPO·12H2O和0.2gKH,PO.溶于1000mL的水中制备 PBS，用压力蒸汽灭菌（见6.2）。配制后如不立即使用，应置于2℃～8℃保存。保存期限不得超过 1个月。
5.3.12从生胰腺分离的胰蛋白酶和PBS溶液
5.3.12.1将从牛胰腺分离到的1.0g胰蛋白酶溶解于100mLPBS中，并用震荡器震荡2h以充分混 匀。使用0.22um过滤器对溶液进行过滤除菌。如不立即使用，则分装后放在一80℃冰箱里保存。使 用前，于37℃水浴解冻。 5.3.12.2将1.0mL按5.3.11.1要求配制的溶液加至9.0mLPBS中混匀，分装并保存在低于一20℃ 的冰箱。使用前，于37℃水浴解冻
用于蚀斑试验的琼脂培养
溶液加人1000mL双倍浓度的维持培养 充分混匀。对流感病毒的蚀斑试验时，加3.0mL胰蛋白酶。使用前，把溶液放37℃水浴锅温浴。
将15g细胞培养琼脂溶于1000mL水中混匀，用高压蒸汽灭菌。使用前，将溶液放60℃水
5.3.15.3琼脂培养基的制备
5.3.16卵磷脂吐温大豆酪蛋白培养液（SCDLP肉汤培养基）
将17.0g酪蛋白陈、3.0g天豆蛋白藤、5.0gNaCL、2.5gNa2HPO4、2.5g葡萄糖和1.0g卵磷月 1000mL水中。搅拌均匀后加人7.0g非离子型表面活性剂吐温80，用NaOH溶液或HC1溶溶 I值调整至6.8～7.2(25℃），用高压蒸汽灭菌。配制后如不立即使用，应置于2℃～8℃保藏。 限不得超过1个月
34±1）℃和（37±1)℃，可维持5%的二氧化碳浓
黑龙江建筑职业技术学院图书馆工程现场临时用电施工组织设计可以满足温度（121土2）℃和压力（103土5）kPa下的操作。
于灭菌或干燥试验材料
能保持160℃～180℃的温度，温度波动不超过士2℃。控速范围500r/min~10000r/min， 确度1%。
符合YY0569要求的IⅡI级及以上生物安全相
合YY0569要求的Ⅱ级及以上生物安全柜
用于培养细胞的观察。
量程:10 μL~100 μL,100 μL~1 000 μL,1 ml
控温范围：25℃~55℃电厂工程施工组织设计，温度准确度1℃