标准规范下载简介
GBT 39729-2020 细胞纯度测定通用要求 流式细胞测定法.pdfGB/T 39729—2020
General requirements for measurement of cell purityFlow cytometr
国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会
DB63／T 1601-2017标准下载GB/T39729—2020目次前言引言1范围2规范性引用文件3术语、定义和缩略语4方法原理5通用要求5.1试剂或材料5.2仪器设备5.3样本制备5.4试验步骤5.5数据分析5.6方法确认5.7报告参考文献
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本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任， 本文件由国家标准物质研究中心提出并归口， 本文件起草单位：中国计量科学研究院。 本文件主要起草人：刘瑛颖、王晶、陈川、傅博强、袁宝珠、牛春艳、隋志伟
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细胞纯度是评价和分析细胞样本特性与细胞产品质量的基本参数，因此医学检验、生物医药研 和质量检验等领域需要广泛开展细胞纯度的测量。流式细胞术可对液体中悬浮单颗粒或细胞进 、多参数分析，是一种常用的细胞纯度测量方法。为了实现不同实验室、平台、操作人员等测量系 之间的数据一致性，需要对通过流式细胞术进行细胞纯度试验的技术环节标准化
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本文件描述了流式细胞仪测定细胞纯度的术语、定义和缩略语、方法原理，以及包括试剂或材料、仪 器设备、样本制备、试验步骤、数据分析、方法确认和报告的通用要求 本文件适用于研究、生产与检验中通过流式细胞仪进行的细胞纯度的测定
文件没有规范性引用文件
下列术语和定义适用于本文件。 3.1.1 目标细胞celloftestingtarget 与检测目标相一致，具有流式细胞仪可检测特征（如大小、数量、特定标志物)的细胞。 3.1.2 细胞纯度cellpurity 目标细胞占样本总细胞数量的百分率。 3.1.3 细胞染色cellstaining 细胞特定成分与荧光染料或标记了荧光染料的特异性抗体结合后进行检测的一种技术 注：特定成分为蛋白质、DNA、RNA等
下列缩略语适用于本文件。 FSC：前向角散射光（ForwardScatter） SSC：侧向角散射光（SideScatter）
使用流式细胞仪，通过总细胞和目标细胞不同的光学（散射光和荧光)特性，对待测样本中的总 目标细胞进行区分和计数。根据总细胞和目标细胞的测量数量，计算得到目标细胞纯度。
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5.1.2荧光染料标记的抗体
确保选择的荧光染料标记的抗体对目标细胞具有
鞘液应为无荧光本底的平衡电解质溶液，其洁净度、吸光度、PH值、渗透压应满足流式细胞仪的 要求。
缓冲溶液不应造成待测细胞的破裂、形态 重改变或者聚团，不应对待测细胞的光学特性产生显著 求和方法应根据具体细胞类型确定。
固定剂不应造成待测细胞染色后的光学特性和形
5.1.6荧光补偿样品
荧光补偿样品为单荧光染色细胞或者荧光补偿微球。荧光补偿样品的荧光染料应与待测细胞所 发光染料一致。荧光补偿样品的荧光强度至少要与待测细胞一致，或者超过待测细胞的荧光强度
具有荧光检测通道和散射光检测通道，荧光通道能够检测选择的荧光染料，散射光检测通道包括 FSC和SSC。 流式细胞仪应经过校准，并定期核查准确性和精密度
微量移液器量程为10μL～1000uL。微量移液器应经过检定或校准，并定期核查其移取量的准确 度和精密度。
安防设施招标文件发售版.pdf涡旋振荡器使用的涡旋转速不应大于3000r/min。使用者应监测并记录涡旋振荡器的使用转速、 时长等条件
5.2.4温度控制装置
用于细胞染色的孵育温度控制或试剂、样本的保存，例如冰箱。使用者应监测并记录温度控制装置
的温度准确性和稳定性
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根据原始样本的类型选择合适的待测 本制备方式。待测样本应是单分散细胞悬液，即待测 的细胞以单个细胞存在，没有细胞团或细胞碎片
TB／T 2975-2018标准下载运送条件不应影响待测细胞的生物特性和检测结
待测样本应具有标签，标签上注明样本类型、样本采集和制备的时间和地
细胞染色前，应根据流式细胞仪的性能参数、待测细胞的黏附、目然沉降等特性来调整样本中的细 抱浓度。 如果细胞浓度过高，可用缓冲溶液对待测样本进行稀释，并记录稀释倍数， 根据荧光染料或特异性的荧光染料标记抗体质量参数确定样本量及染料、抗体浓度、孵育条件。 保证待测样本和荧光染料或特异性的荧光染料标记抗体充分混合，应选择合适的涡旋转速和时长 转速过高或时间过长会造成细胞破损。 待测样本完成细胞染色后，应尽快进行上机检测。如果无法尽快上机检测，应通过固定剂进行固定 并适当条件保存，宜4℃8℃避光保存