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HJ 347.1-2018 水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法

适用范围 规范性引用文件 3术语和定义. 方法原理... 干扰和消除... 试剂和材料... 仪器和设备.. K 样品. 分析步骤. 10结果计算与表示.. 11精密度和准确度. 12质量保证和质量控制. 13废物处理 14注意事项 附录A（资料性附录）粪大肠菌群检验记录及报告格式

水质粪大肠菌群的测定滤膜法

水质粪大肠菌群的测定滤膜

本标准规定了测定水中粪大肠菌群的滤膜法。 本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。 本方法的检出限：当接种量为100ml时，检出限为10CFU/L；当接种量为500ml时， 检出限为2CFU/L

本标准引用了下列文件或其 期的引用文件JC／T 2454-2018 超薄钢化玻璃，其有效版本适用于本 标准。 GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导 HJ494水质采样技术指导 HI/T91地表水和污水监测技术规范

样品通过孔径为0.45um的滤膜过滤，细菌被截留在滤膜上，然后将滤膜置于MFC选 择性培养基上，在特定的温度（44.5℃）下培养24h，胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长， 粪大肠菌群能生长并发酵乳糖产酸使指示剂变色，通过颜色判断是否产酸，并通过呈蓝色或 蓝绿色菌落计数，测定样品中粪大肠菌群浓度。

5.1活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集（8.1）

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂，实验用水为蒸馏 水或去离子水。

7.1采样瓶：1L、500ml或250ml带螺旋帽或磨口塞的广口玻璃瓶。

采样后应在2h内检测，否则，应10℃以下冷藏但不得超过6h。实验室接样后，不能 立即开展检测的，将样品在4℃以下冷藏并在2h内检测

先估计出适合在滤膜上计数所使用的体积，然后再取这个体积的1/10和10倍，分别过滤。理 想的样品接种量是滤膜上生长的粪大肠菌群菌落数为20～60个，总菌落数不得超过200个。 当最小过滤体积为10ml，滤膜上菌落密度仍过大时，则应对样品进行稀释。1:10稀释的方法 为：吸取10ml样品，注入盛有90ml无菌水（6.3）的三角烧瓶中，混匀，制成1:10稀释样品。 样品接种量参考表见表1。

表 1 接种量参考表

用灭菌镊子以无菌操作夹取无菌滤膜（6.2）贴放在已灭菌的过滤装置（7.4）上，固定 好过滤装置，将样品充分混匀后抽滤，以无菌水（6.3）冲洗器壁2～3次。样品过滤完成后， 再抽气约5S，关上开关。

用灭菌镊子夹取滤膜移放在MFC培养基（6.1）上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与培 养基完全贴紧，两者间不得留有气泡DB11／T 1165.3-2017 收费公路联网收费系统 第3部分：收费系统介质技术要求与数据格式.pdf，然后将培养皿倒置，放入恒温培养箱内，44.5℃土0.5℃ 培养24h±2h。

9. 3. 1空白对照

9.3.2阳性及阴性对照

要用无菌水（63）按照步骤9.1和9.2进行实验室

将粪大肠菌群的阳性菌株（如大肠埃希氏菌Escherichiacoli）和阴性菌株（如产气肠杆 菌Enterobacteraerogenes）制成浓度为40～600CFU/L的菌悬液，分别按照9.1～9.2步骤培养， 阳性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应查 明原因后重新测定。

MFC培养基上呈蓝色或蓝绿色的菌落为粪大肠菌群菌落，予以计数。 MFC培养基上呈灰色、淡黄色或无色的菌落为非粪大肠菌群菌落DB37／T 3163-2018 金属非金属露天矿山企业生产安全事故隐患排查治理体系实施指南，不予计数。 结果判读参考图片见图1。