标准规范下载简介
GB／T 41407-2022 微流控芯片核酸恒温扩增仪技术要求.pdfICS 11.040 CCS C. 44
GB/T 414072022
DBJ／T13-319-2019 福建省建筑起重机械信息系统建设应用规程.pdf流控芯片核酸恒温扩增仪技术要求
nical requirement of nucleic acid isothermal amplification analyzer based on microfluidic chips
前言 范围 规范性引用文件 术语和定义 分类和命名 要求 试验方法 标志、标签和说明书 包装、运输和储存 . 参考文献
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起章 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国生物芯片标准化技术委员会（SAC/TC421)提出并归口。 本文件起草单位：博奥生物集团有限公司、北京博奥晶典生物技术有限公司、清华大学、四川大学华 西医院、首都医科大学附属佑安医院、北京大学人民医院。 本文件主要起草人：黄国亮、黄琴、罗贤波、李若然、邢婉丽、辛媚。
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本文件规定了微流控芯片核酸恒温扩增仪的分类和命名、标记、要求、试验方法、检验要求、标签、使 用说明书、包装、运输和储存。 本文件适用于离心管式载体和微流控芯片载体的核酸恒温扩增仪或核酸恒温扩增分析仪的生产、 销售、使用和检验。
YY/T1173界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 核酸恒温扩增nucleicacidisothermalamplification 由常温升温至一固定的扩增高温后，在该固定温度下进行核酸（包括DNA和RNA)体外快速复制 放大的过程。 注：因使用的聚合酶和引物的不同，扩增高温的温度值存在一定的差异，需要根据实际试验条件进行优化。 3.2 核酸恒温扩增仪 nucleic acid isothermal amplification analyzer 具有恒定温度控制的功能，借助一固定的扩增高温进行核酸序列的特异性扩增，通过光学系统接收
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扩增仪可根据控温方式、载体、载体运动状态、荧光通道和体积等不同的方面分类，具体如下： 根据控温方式可分为空气浴加热扩增仪、水浴加热扩增仪、金属或陶瓷接触加热扩增仪。 根据样品载体可分为离心管式扩增仪、孔板式扩增仪和微流控芯片扩增仪。 根据样品载体运动状态可分为静态扩增仪和旋转扫描式扩增仪。 根据采用荧光通道的多少可分为单通道荧光扩增仪和多通道荧光扩增仪。 根据体积可分为台式扩增仪、便携式扩增仪和工作站型扩增仪。
软件安装光盘 扩增仪主机主要由控制系统、电源系统、温控系统、检测系统和外壳部件组成
扩增仪可根据分类不同命名为核酸恒温扩增实时荧光检测系统、核酸恒温扩增分析仪、恒温扩增分 析仪等，其中“恒温”也可用“等温”替代。命名还可增加载体内容，如微流控芯片核酸恒温扩增分析仪、 管式核酸恒温扩增分析仪、孔板式核酸恒温扩增分析仪
5.1.1平均升温速率
仪器从37℃升温至65℃过程中，平均升温速率不应小于10.0℃/
5.1.2平均降温速率
恒温计时开始10s内到计时结束之间温度测量数据的平均值与模块设置温度差值的绝对值，不应 大于0.5℃。
5.1.5温度持续时间准确度
设定恒温的时间与温度测量
温度有效使用区不同位置之间温度测量数据大值减小值的差值不应大于1.0℃。
5.2.1光强度检测重复性
对激发光激发标准荧光（或浊度)物质的同一份样本进行连续重复检测，荧光（或浊度引起的光强变 化）信号测量值的变异系数（CoefficientofVariation，CV)不应大于5%
注：如标准荧光料FAM溶液
5.2.2光强度检测精密度
对同一种激发光激发标准荧光（或浊度)物质相同质量或体积的多份样本进行连续重复检测，荧光 (或浊度引起的光强变化）信号测量值的变异系数CV不应大于15%。 注：如标准荧光染料FAM溶液。
.2.3光强度检测线性度
对系列标准荧光（或浊度）物质的浓度梯度样本进行检测，计算各浓度荧光信号（或浊度引起的光强 变化)测定值与稀释浓度比例的线性回归系数r1，不应低于0.990。 注：如标准荧光染料FAM溶液，稀释成5个梯度，如10μmol/L、5μmol/L、2.5μmol/L、1.25μmol/L和 0.625umol/L
5.3.1样本检测重复性
对标准核酸样本高中低浓度样本进行等温扩增检测，相同浓度检测的指数级扩增拐点时间的变异 系数CV，不应大于10%， 注：如金黄色酿脓葡葡球菌（Staphylococcusaureus，Sau）或结核分枝杆菌（MycobacteriumTuberculosis，Mtb）的核 酸样本的10°copies/uL,10*copies/μL、10°copies/μL
5.3.2样本检测线性度
对标准核酸样本稀释的系列梯度浓度样本进行扩增检测，各浓度的指数级扩增拐点时间与浓度对 数值的线性回归系数r2，不应低于0.980。 注：如Sau或Mtb的核酸样本的5个梯度10°copies/μL、105copies/μL、10*copies/μL、103copies/μL 10"copies/μL.
对标准核酸样本稀释的系列梯度浓度样本进行扩增检测，各浓度的指数级扩增拐点时间与浓度对 数值的线性回归系数T2，不应低于0.980。 注：如Sau或Mtb的核酸样本的5个梯度10°copies/μL、105copies/μL、10*copies/μL、103copies/μL 10"copies/μL.
.4核酸扩增检测灵敏质
5.5不同通道荧光干扰
过于多色荧光标记测量，其他通道荧光检测强度，不应高于目标通道荧光阈
外观应满足以下要求： a）面板上的图形符号和文字准确、清晰、均匀、无划痕； b）紧固件连接牢固可靠，无松动； ）运动部件平稳，无卡住、突跳及显著空转，摩擦阻力均匀，键组回调灵活。
电气安全应符合GB4793.1和YY0648的规定。 加热装置的电气安全应符合GB4793.6的规定。 设备安装、操作和维护中的电气安全还应符合GB4793.9的规定。
应符合GB/T14710中机械I组和环境I组的要求
5.10多加热模块多加热通道设备
个加热模块和加热通道均应满足5.1~5.9的要
6.1.1额定电源：220V±22V,50Hz士1Hz。 6.1.2环境温度：15℃30℃。 6.1.3 相对湿度：20%~85%。 6.1.4 大气压力：85.0kPa106.0kPa。 6.1.5扩增仪开机后预热时间不少于10min。 6.1.6扩增仪使用前应按照仪器生产厂家的说明书操作或校准。 6.1.7扩增仪测量时采用标准荧光物质材料和标准核酸样本或标准核酸试剂盒。 6.1.8扩增仪测温工具的精度不低于0.01℃，并且在校验的有效期内。 6.1.9 9温度控制测试标定方法采用水浴或其他方法作为恒温单元，用设备内部温度控制器和标准温度 测量指示表同时测量温度，各连续记录5次取平均值，比较二者的温度测量数据，评价温度测量的准 确度
1.10正常工作温度控制流程通过软件设置
6.1.10正常工作温度控制流程通过软件设置：
第1步，从常温（15℃～30℃）升温至37℃，时间3min； 第2步，从37℃升温至65℃，保持65℃恒温，时间45min，其中从37℃到65℃的升温时间 不大于3min； 第3步，从65℃降温到37℃以下，降温时间不大于5min。 使用专用软件或测温工具获得动态测量腔体加热或冷却的温度变化实时测量读数值，用计算机时 钟（或秒表）计时。 注1：6.1.1～6.1.10中的要求与生产企业标称的产品规格不一致时，以产品规格为准。 注2：标准核酸样本如Sau或Mtb。
6.2.1平均升温速率
从温度控制流程中，获取从37℃到65℃升温过程的温度实时测量数据，恒温37.0℃士0.5℃最后 个温度点，温度记为TA，恒温65.0℃士0.5℃的第二个温度点，温度记为TB沙峁至贺川改造公路施工组织设计，从TA到达TB的时间 记为t1，按照公式(1)计算平均升温速率VTup。连续记录3次取平均值，检查结果是否符合5.1.1的 规定。
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式中： VTup 从37℃到65℃的平均升温速率； TA 温度控制流程中，恒温37.0℃士0.5℃最后一个温度点； TB 温度控制流程中，恒温65.0℃士0.5℃的第二个温度点； 从 TA到达 Ta的时间
6.2.2平均降温速率
从温度控制流程中，获取从65℃到37℃降温过程的温度实时测量数据，恒温65.0℃士0.5℃最后 个温度点，温度记为Tc，恒温37.0℃士0.5℃的第一个温度点，温度记为Tp，从Tc到达Tp的时间 记为t2，按照公式（2)计算平均降温速率Vtdow。连续记录3次取平均值，检查结果是否符合5.1.2的 规定。
接6.1.10第2步操作，从37℃升温到65℃迳古潭二隧道隧道开挖施工方案，当温度达到恒温65.0℃土0.5℃第10s开始记录温度 实时测量数据，连续记录30次，每次记录的时间间隔不大于0.1s，从该数据找出温度的最高值Tx和 最低值Tmin，按照公式（3)计算控温精度偏差△T1，连续实验5次取最大值，检查结果是否符合5.1.3的 规定，
△T——恒温65.0℃土0.5℃控温精度偏差 Tmax 恒温65.0℃士0.5℃温度最高值；